Tópicos en

Criomicroscopía Electrónica

y Cristalografía de rayos X

de Proteínas

Curso de posgrado de la FCEN-UBA a dictarse durante Agosto/Septiembre 2019

PROGRAMA e INSCRIPCION

El objetivo del curso es que el estudiante adquiera conocimientos avanzados sobre criomicroscopia electronica (CryoEM) y cristalografía de rayos X de monocristal (DRX) aplicadas al area de la biologia estructural. Introducir al estudiante en la problemática de la obtencion de cristales, obtención de datos de difracción de rayos X de monocristal, determinación estructural a través de resolución y posterior refinamiento de datos cristalográficos. La cristalografía está mejor equipada para proporcionar información dinámica de alta resolución en función del tiempo, la temperatura, la presión y otras perturbaciones, mientras que cryo-EM ofrece una mayor comprensión al realizar mapeos conformacionales y energéticos, especialmente a medida que los algoritmos para deconvolucionar la heterogeneidad conformacional se vuelven más avanzados. . Programa completo AQUI

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Listado de estudiantes becados y de seleccionados para participar de la clases practicas AQUI a

Cristalografia y Difraccion

Estado Cristalino, Redes y Celdas Elementales, Direcciones y Planos cristalográficos, Experiencia de difracción por material cristalino. Nucleación primaria y secundaria. Efectos de las impurezas presentes. Crecimiento de cristales. Robots de cristalizacion

Microscopía electrónica tridimensional

Concepto de partícula única. Métodos de microscopía electrónica con tinción negativa y en condiciones criogénicas (CryoEM). Plataformas para experimentos de CryoEM. Equipamiento necesario. Automatizaciones. Preparación de las muestras y colecta de datos. Tipos de grillas y soportes. Preparación de las grillas a temperatura ambiente y en condiciones criogénicas.

Resolucion de Estructuras

Cristalografia: Métodos en el espacio directo, Métodos en el espacio reciproco, Métodos de Fourier, Teoría de Cuadrados Mínimos. CryoEM: Formación de la imagen Transformada de Fourier y espacio reciproco. Contraste de amplitudes y fases. Función de transferencia de contraste (CTF). Desenfoque y su efecto. Filtros.|

Analisis de Resultados

Evaluación de la calidad de los datos reportados, Armado de archivo CIF, Busqueda en Base de Datos, Desorden estructural. Refinamiento. Construcción del modelo. Validación. Interpretación del modelo atómico. Depósito en bancos de datos (EM y PDB).

Agosto/Septiembre 2019 - 15 dias Intensivo

Cronograma

HORARIO: Lunes a Viernes de 9 a 18 hs

  • Inicio: Lunes 26/8 - 9 hs
  • Aula: 213, Espacio CELFI DATOS - FCEN - Pabellon 2

    ¿Como llegar? AQUI

  • a
  • Examen Final Escrito: Viernes 6/9 - 16 hs
  • Aula: 213, Espacio CELFI DATOS - FCEN - Pabellon 2

Cronograma completo AQUI

Guias y Apuntes

Difraccion

TP
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Difraccion estructura de ADN

TP
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Cristalizacion Lizosima

TP
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Resolucion Lizosima

TP
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Presentacion Curso

Teorica 0
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Introduccion Historica CryoEM

Teorica 1
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Estructura y Funcion de proteinas

Teorica 2
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Expresion de Proteinas

Teorica 3
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CryoEM Teoria y equipamiento

Teorica 4
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Preparacion muestras CryoEM

Teorica 7
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Preparacion muestras CryoEM

Teorica 7
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RMN

Teorica 9
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Nanobodies

Teorica 10
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SAXS

Teorica 11
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Introduccion Historica Rayos X

Teorica 12
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Generacion y Difraccion de Rayos X

Teorica 13
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Celdas y Simetría

Teorica 14
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Cristalizacion y Determinación estructural de Proteinas

Teoricas 15 y 16
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Apuntes

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Docentes

Contacto

CONSULTAS: cristalografiaproteinas@gmail.com

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Para consultar por Servicios de Microscopia: lia@df.uba.ar
Para consultar por Servicios de Difraccion de Rayos X de PROTEINAS: lotero@leloir.org.ar
Para consultar por Servicios de Difraccion de Rayos X de moleculas pequeñas hacer click AQUI
Para contactar con MICROBES AQUI, o Dra. Margarida Archer: archer@itqb.unl.pt
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Ultima actualización 04/09/2019